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    HE染色提高染色效果的技巧分享
    來源： 時間：2024-09-10 11:12:45 瀏覽：3272次

    HE染色提高染色效果的技巧分享

     

    HE染色（蘇木精-伊紅染色）是一種常用的組織學染色方法，廣泛應用于病理學、生物學等領域。提高HE染色效果，對于病理診斷和科學研究具有重要意義。

    一、準備工作

    1. 組織固定：固定是染色成功的關鍵。使用10%中性甲醛溶液固定組織，固定時間一般為24小時。固定時間不宜過長或過短，以確保組織結構完整。

    2. 脫水：脫水過程要徹底，避免組織內殘留水分影響染色效果；建議使用梯度酒精（70%、80%、90%、95%、100%）進行脫水。

    3. 透明：使用二甲苯進行透明處理，透明時間不宜過長，以免組織過于脆弱。

    4. 浸蠟：選用熔點適宜的石蠟進行浸蠟，保證組織完全浸蠟。

    二、切片制作

    1. 切片厚度：切片厚度以4-6μm為宜，過厚或過薄都會影響染色效果。

    2. 切片展平：切片在水中展平，避免皺褶和折疊。

    3. 切片粘貼：使用粘附性較好的載玻片，確保切片牢固粘貼。

    三、染色技巧

    1. 蘇木精染色：

    （1）充分氧化：蘇木精染液在使用前需充分氧化，使染液呈紫紅色。

    （2）控制染色時間：染色時間根據組織類型和細胞成分進行調整。一般染色時間為5-10分鐘，時間過長會導致細胞核過度染色，時間過短則染色不充分。

    （3）分化：使用1%鹽酸酒精進行分化，分化時間不宜過長，以免細胞核褪色。

    2. 伊紅染色：

    （1）選用合適濃度的伊紅染液：一般使用1%的伊紅染液，濃度過高會導致細胞質染色過深，過低則染色不充分。

    （2）控制染色時間：伊紅染色時間一般為1-3分鐘，根據實際情況調整。

    四、脫水、透明、封片

    1. 脫水：使用梯度酒精（95%、100%）進行脫水，每個梯度酒精浸泡2-3次，每次1-2分鐘。

    2. 透明：使用二甲苯進行透明處理，透明時間不宜過長，以免組織過于脆弱。

    3. 封片：選用中性樹膠或加拿大樹脂進行封片，封片時避免氣泡產生。

    五、注意事項

    1. 染液配制：嚴格按照配方配制染液，確保染液質量。

    2. 染液更新：定期更換染液，避免染液老化影響染色效果。

    3. 室溫控制：染色過程中，保持室溫在18-25℃，避免溫度波動影響染色效果。

    4. 避光操作：在染色過程中，盡量避免強光照射，以免染料分解。

    5. 清潔儀器：確保染色缸、載玻片等儀器清潔，避免雜質影響染色效果。

    六、常見問題及解決方法

    1. 細胞核染色過深：適當縮短蘇木精染色時間，加強分化。

    2. 細胞質染色過深：適當縮短伊紅染色時間，降低伊紅染液濃度。

    3. 染色不均勻：檢查切片展平情況，確保切片均勻接觸染液。

    4. 組織脫落：檢查切片粘貼情況，確保切片牢固粘貼。

     

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    12條評論
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    全部 3小時前 四川
    文字是人類用符號記錄表達信息以傳之久遠的方式和工具?，F代文字大多是記錄語言的工具。人類往往先有口頭的語言后產生書面文字，很多小語種，有語言但沒有文字。文字的不同體現了國家和民族的書面表達的方式和思維不同。文字使人類進入有歷史記錄的文明社會。
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